在厌气条件下,酵母菌分解产生酒精并释放出CO2的过程称为酒精发酵。这一作用是有兼氧厌氧性的酵母菌细胞中的酒精发酵系统进行无氧呼吸产生多量酒精的缘故。此原理是酿酒工业产酒精酿制酒类饮料的基础。
(1) 菌种:在麦芽汁琼啤酒脂培养基上培养3天的啤酒酵母。
(2) 器材:酒精发酵液,艾氏发酵管,10%H2SO4,10g/L K2Cr2O7,150g/L NaOH,路歌氏碘液,试管,10ml刻度吸管,载玻片,接种环,酒精灯,挂线标签,显微镜。
1、 发酵液准备
取灭菌的艾氏发酵管1支,按无菌操作法倒入木耳菌的酒精发酵液,使发酵液充满管部并赶走气泡,液量加至下端球部1/4处,塞好棉塞,备用。
2、 接 种
用接种环接入啤酒酵母菌数环(要求多量),接种时,以接种环放至发酵管壁充分研磨使细胞分散,轻轻振荡,使之混匀。用挂线标签标记后悬于发酵管上。
3、 培 养
置发酵管于28°C下培养24-28h,观察结果。
4、 结 果 检 查
(1) 打开发酵液棉塞,嗅闻有无酒香味产生,记录之。
(2) 记录发酵液管顶部气体容积,然后用吸管酌情吸出球部发酵液少许弃去,并向管内加入与发酵液等量的150g/L NaOH溶液,轻轻摇动,使管内CO2气体渐被碱液吸收,发酵液面逐渐上升,即证明有CO2产生。其原因氏:
CO2+NaOH→NaHCO3
(3) 取发酵液制成水浸片,检验酵母细胞形态及出芽生殖现象。
记述试验结果。